Nachdem die machtgierige blaue Eule Striga aus dem GaHoole Baum vertrieben wurde, kehrt endlich wieder Frieden in das Königreich ein. Doch heimlich vereinen Striga und Nyra ihre Kräfte und beschwören gemeinsam eine uralte grausame Macht herauf, mit der sie Chaos und Verwüstung über die Welt bringen wollen. Als die Wächter von GaHoole davon erfahren, rufen sie alle befreundeten Tiere auf, mit ihnen gegen die dämonischen Feinde zu kämpfen und das Schicksal der sechs Eulenkönigreiche ein für alle Mal zu entscheiden.